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技術文章

ELISA試劑盒實驗靈敏度高的原因

點擊次數:322   發布時間:2023/3/27 16:22:16

 
ELISA試劑盒試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在臨床上得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。我將操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給同行帶來一些啟發,提高試驗質量。
 
ELISA試劑盒試驗操作中可能影響結果的原因及解決辦法分析:
 
1 選擇試劑
 
選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
 
2 加樣可能原因:
 
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
 
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱等待時間過長(特別是室內溫度較高時);
 
3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
 
ELISA試劑盒解決辦法:
 
1) 標本為血清:好將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒采血管混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
 
2) 加樣后及時放入孵箱。
 
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
 
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,好選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
 
5) 標本較多時,請分批操作。
 
3 孵育可能原因:
 
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗徹底;
 
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗徹底。

原創作者:上海恒遠生物技術發展有限公司

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