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ELISA試劑盒實驗土壤/植物樣本的采集及保存方法

點擊次數:1505   發布時間:2023/11/14 15:33:49

ELISA試劑盒實驗土壤/植物樣本的處理方法

植物標本的精采集及保存

1、 稱取0.1g(誤差±3%以內)新鮮植物組織樣本,在液氮中充分研磨;

2、 加入1ml的提取液(80%甲醇), 置于-20度過夜;

3、 于4度,8000rpm,離心1小時,取上清;

4、 上清液過C-18固相萃取柱。具體步驟是: 80%甲醇(1ml)平衡柱→上樣→收集樣品→移開樣品后用100%甲醇(5ml)洗柱→100%yimi5ml)洗柱→100%甲醇(5ml)洗柱→循環。過柱后的樣本真空干燥或氮氣吹干,保存備用;

5、 上樣加入pH7.4 PBS緩沖液(1ml定容);靹蚝笫覝胤胖30分鐘,然后4度離心(8000rpm,15分鐘),取上清并暫時保存于4度待用。

6.植物標本中相關酶或蛋白的測定:(粗提。

1、 新鮮植物組織請在液氮中充分研磨;

2、 加入樣品體積9倍的提取液(pH 7.4 PBS緩沖液),3、 請于4度,8000rpm,離心30分鐘,取上清并暫時保存于4度待用。

土壤:稱取1g土壤,加入9gpH7.2-7.4左右的PBS,用手工將標本充分混勻。2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000/分),仔細收集上清。分裝一份待檢測,其余冷凍備用,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。如果是測分泌蛋白,直接取上清檢測,測試細胞內蛋白,要破碎細胞。

 

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原創作者:上海恒遠生物技術發展有限公司

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